2025-06-18 12:04:44
而且因?yàn)橛?條定位線,與劃痕相交,這樣就有10個(gè)可固定監(jiān)測(cè)點(diǎn),不作重復(fù),誤差也很小。2、如果你連續(xù)監(jiān)測(cè)24小時(shí),你需要考慮到劃痕縮小是細(xì)胞遷移和細(xì)胞繁殖共同作用的結(jié)果,而不是單純的細(xì)胞遷移。如果你要單純的考慮細(xì)胞遷移,你可以先用絲裂霉素(1ug/ml)處理一小時(shí),抑制細(xì)胞的**,這樣你的結(jié)果就是細(xì)胞遷移的作用了。另外,使用無(wú)血清培養(yǎng)基也可以降低增殖對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。3、照片拍完之后,可以用ImageJ來(lái)測(cè)量劃痕區(qū)域的像素定量比較細(xì)胞遷移的速度。4、雖然無(wú)血清培養(yǎng)可以忽略細(xì)胞增殖的影響,但是由于細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)整體性的下調(diào)節(jié),細(xì)胞遷移的速度也會(huì)慢很多。5、應(yīng)盡量清洗掉散落的細(xì)胞,對(duì)于一些細(xì)胞,低血清濃度下也能重新貼壁并增殖,此外也影響數(shù)據(jù)美觀。四、常見(jiàn)問(wèn)題1.劃痕法測(cè)量適用的細(xì)胞范圍較小,一般只適用于上皮細(xì)胞,纖維樣細(xì)胞。2.雖然無(wú)血清培養(yǎng)可以忽略細(xì)胞增殖的影響,但是由于細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)整體性的下調(diào)節(jié),細(xì)胞遷移的速度也會(huì)慢很多。3、在用PBS緩沖液沖洗時(shí),注意貼壁慢慢加入,以免沖散單層貼壁細(xì)胞,影響實(shí)驗(yàn)拍照結(jié)果。4、一般做劃痕實(shí)驗(yàn),需要排除細(xì)胞增殖的影響,一般在不影響細(xì)胞增殖的情況下采用低血清(