2025-05-23 01:02:57
外泌體鑒定,可以用和表面抗原對(duì)應(yīng)的抗體進(jìn)行免疫印跡(WB)、透射電子顯微鏡(TEM)、納米粒徑分析(如NanoSight LM10)等來(lái)驗(yàn)證。前面也說(shuō)了,ISEV建議用表面蛋白來(lái)界定所提取的細(xì)胞外囊泡,所以用CD63來(lái)做WB或ELISA是必不可少的了。使用Wako的PS Capture? Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP)(產(chǎn)品編號(hào)298-80601),既能鑒定外泌體的CD63信號(hào),又能進(jìn)行定量、定性分析,一舉兩得!南京英瀚斯可以做外泌體鑒定。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,使其可以穿透許多生物膜,南京外泌體檢測(cè)服務(wù),優(yōu)先南京英瀚斯。河北專(zhuān)門(mén)做外泌體粒徑分析
外泌體的提取方法有多種:包括傳統(tǒng)的差速離心、密度梯度離心,以及后來(lái)發(fā)展的超濾法、聚合物沉淀法、免疫分離、隔離篩選法、體積排阻色譜法等。這些方法各有利弊。外泌體經(jīng)細(xì)胞分泌后存在于體液或者血液中,故檢測(cè)外泌體的樣本一般為血液(全血、血漿)、體液(尿液、唾液、腦脊液、羊水、唾液等)、細(xì)胞上清液。提取所需要樣本量血清:樣本量>5ml(全血10ml)。血漿:樣本量>5ml(全血10ml)。體液:樣本量>20ml。細(xì)胞培養(yǎng)上清液:樣本量>20ml。貴州哪家做外泌體實(shí)驗(yàn)外泌體提取試劑盒,南京英瀚斯。
外泌體的臨床應(yīng)用:1.在疾病診斷中的應(yīng)用潛能:外泌體存在于所有的生物體液中,并由所有細(xì)胞分泌,這使得外泌體在液體活檢中具有吸引力,可用于縱向取樣跟蹤疾病進(jìn)展。外泌體的生物發(fā)生可以捕獲復(fù)雜的細(xì)胞外和細(xì)胞內(nèi)分子,可用于***的、多參數(shù)的診斷檢測(cè)。外泌體的表面蛋白也有助于其免疫捕獲和富集。外泌體診斷應(yīng)用的重點(diǎn)疾病包括心血管病、影響***系統(tǒng)的疾病和**。這項(xiàng)努力正在迅速擴(kuò)展到肝臟、腎臟和肺部的其他疾病。2.在疾病***中的應(yīng)用潛能:外泌體向病變細(xì)胞運(yùn)送功能物質(zhì)的特性有利于它們作為***載體。與脂質(zhì)體相比,外泌體的免疫***率低。此外外泌體已被證實(shí)且具有良好的耐受性,無(wú)明顯副作用
外泌體的研究是一個(gè)活躍的研究領(lǐng)域,正在進(jìn)行的技術(shù)和實(shí)驗(yàn)進(jìn)展可能會(huì)產(chǎn)生關(guān)于它們的異質(zhì)性和生物學(xué)功能的有價(jià)值的信息,并增強(qiáng)利用它們的***和診斷潛力的能力。是否外泌體的產(chǎn)生和內(nèi)容物隨年齡變化?這些信息可以為組織衰老、***退化和程序化或過(guò)早老化提供新的見(jiàn)解。EVs和/或外泌體是否先于地球上單細(xì)胞有機(jī)體初次出現(xiàn)?這是一個(gè)大膽而誘人的猜測(cè)。單外泌體的鑒定和分離以及低溫電子顯微鏡分析有可能明顯提高我們對(duì)外泌體基礎(chǔ)生物學(xué)的理解以及它們?cè)趹?yīng)用科學(xué)和技術(shù)中的應(yīng)用。不容錯(cuò)過(guò)的外泌體(Exosome)研究方法,南京英瀚斯生物。
外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年, Valadi等發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細(xì)胞分泌 的 exosome可以被人的肥大細(xì)胞捕獲,并且其攜帶的mRNA成分可以進(jìn)入細(xì)胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì),不僅只是mRNA,exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性,在進(jìn)入靶細(xì)胞后可以靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞中mRNA的水平。這一發(fā)現(xiàn)使得研究人員對(duì)exosome的研究熱情激增,截止已經(jīng)通過(guò)286項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了41860種蛋白質(zhì)、2838種microRNA、3408種mRNA。英瀚斯生物專(zhuān)業(yè)做外泌體檢測(cè)、電鏡、粒徑分析。外泌體檢測(cè)服務(wù)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包,靠譜專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)外包平臺(tái)。河北專(zhuān)門(mén)做外泌體粒徑分析
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外泌體的生成,微泡是由質(zhì)膜的出芽形成的,膜雙層通過(guò)磷脂的不對(duì)稱(chēng)分布來(lái)維持脂質(zhì)的“多面性”。外層富含磷脂酰膽堿和鞘磷脂,而內(nèi)層主要由磷脂酰絲氨酸和磷脂酰乙醇胺形成。然而,胞質(zhì)Ca2+的內(nèi)流可以破壞這種不對(duì)稱(chēng)性,導(dǎo)致磷脂跨膜雙層的重新分配,促進(jìn)膜起泡。依賴(lài)Ca2+的蛋白水解同時(shí)降解膜相關(guān)的細(xì)胞骨架,促進(jìn)出芽過(guò)程。在外泌體形成過(guò)程中,首先,MVE(多囊體)向內(nèi)芽形成小泡,內(nèi)含來(lái)自細(xì)胞質(zhì)的貨物(蛋白質(zhì)、mRNA和miRNAs)。然后,MVE要么與細(xì)胞膜融合釋放外泌體(內(nèi)囊泡),要么與溶酶體融合降解MVE含量。到達(dá)目的地后,外泌體通過(guò)內(nèi)吞途徑或與靶細(xì)胞膜融合,將其內(nèi)容物釋放到細(xì)胞質(zhì)中。細(xì)胞的膜的囊泡也可以直接從細(xì)胞膜上萌發(fā),攜帶活性蛋白、RNA和其他化合物。河北專(zhuān)門(mén)做外泌體粒徑分析